对于七十四岁的慈禧之死，人们尚无疑议，但对于相继去世的光绪皇帝的死，疑虑重重。三十八岁的光绪正直壮年，却死仔慈禧前面，而且仅仅早了一天，则众说纷纭，成为一桩悬而未决的历史疑案。人们首先想到的是，光绪一定是慈禧害死的。那么，事实是这样的吗？
关于光绪的死因历来说法不一。有人认为光绪帝是被袁世凯进药毒死的。因为戊戌变法时，袁世凯向慈禧告密，导致维新派被害。袁世凯害怕慈禧死后，光绪重新执政，于是与庆亲王奕勖勾结，准备废掉光绪，立奕勖之子为帝，但是没有成功，只好对光绪下此毒手。
也有人认为，慈禧太后病危时，深怕自己死后被她废掉的光绪重新当政，继续推行维新变法，所以指使太监下毒手，把光绪皇帝害死，以绝后患。然而慈禧身边的女官德龄一口认定光绪是被李莲英害死的。她以自己的亲身经历写成一本著名的纪实着作《瀛台泣血记》，在书中讲道：万恶的李莲英眼看太后的寿命已经不久，自己的靠山快要发生问题了，便暗自着急起来。他想，与其待光绪掌了权来和自己算帐，不如自己先下手的好。经过了几度的筹思，他的毒计便决定了……
还有人认为，从档案馆所藏的光绪脉案中可知，光绪是由于长期患有多种疾病，最后不支而死。光绪皇帝的身体，自幼就很虚弱。常年腰痛，夜间遗精，睡眠不稳，精力很容易疲惫。亲政后，内忧外患，太后的处处掣肘，心情也很少舒畅。戊戌政变失败后，被幽禁在瀛台，种种精神上的折磨和打击，长期承受巨大的精神负担。
以上的各种猜测都不无道理，令我们实在很难看清光绪的真正死因。
有专家历时多年，由光绪头发中的砷含量入手，利用“中子活化”、“X射线荧光分析”、“原子荧光光度”等影响力现代专业技术手段，最终确认：光绪帝突然“驾崩”系急性肠胃性砒霜中毒所致。
这个结果是用核分析方法测定光绪帝头发中的砷含量得出的。光绪帝遗骨、头发、衣物中高含量的砷化合物为剧毒的三氧化二砷，就是民间常说的砒霜。
在检验中，发现了两个重要的现象：内衣的砷含量高于外衣；胃肠部分的砷含量，大大高于其他部位的衣服。由此，专家得出结论：光绪帝的尸骨的砷，来源于体内。
经医学上测定，人体口服砒霜六十一二毫克，就会中毒死亡。据研究者测算，仅光绪帝的头发的砒霜含量就已经高达二百零一毫克。光绪帝摄入体内的砒霜重量明显大于致死量。
据此推断：光绪帝并不是偶然死在慈禧之前的，而是慈禧在死前授意他人将他毒死的。很可能是由慈禧的亲信太监执行，强行灌服或逼其自服，当场毒发而死。
光绪的死是十分突然的，是整个朝廷都没有事先料到的。光绪死于瀛台涵元殿的时候，满朝文武大臣中没有任何人知道，应该把皇帝安葬在哪里。光绪还没有选择他的“万年吉地”，也就是陵寝用地。光绪虽然坐上了大清皇帝的宝座，却从未掌握真正的实权，连死后都不知道应该葬在什么地方，可算是大清朝最不幸的皇帝。
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